派克资源网 - 每天进步一点点
每天发现一点点!
  • 心得体会
  • 办公文秘
  • 报告总结
  • 致辞讲话
  • 条据书信
  • 合同范本
  • 宣传用语
  • 导游词大全
  • 党团范文
  • 毕业大全
  • 个人写作
  • 其他范文
  • B细胞主要位于外周淋巴组织中的【宫颈癌患者外周血调节性B细胞亚群的检测及临床意义】

    分类:报告总结 时间:2019-05-04 02:38:54 本文已影响

      摘 要 目的:检测宫颈癌患者外周血调节性B细胞的数量以及血清中IL-10及TGF-β的表达水平,探讨Br1在宫颈癌临床监测中的意义。方法:收集50例宫颈癌患者外周血标本,用间接免疫荧光法检测Br1细胞亚群的分布,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IL-10及TGF-β的表达情况。结果:宫颈癌患者外周血Br1的数量明显高于正常对照组,IL-10的含量均明显高于正常对照组(P<0.05),宫颈癌浸润组与正常对照组相比,Br1的数量及IL-10明显升高(P<0.05)。结论:宫颈癌患者中Br1的数量及血浆IL-10明显升高,提示Br1细胞与宫颈癌的发生发展可能存在着一定的关系。
      关键词 宫颈癌 调节 B细胞
      
      AbstractObjective:To detect the levels of Breg in PBMC and IL-10 and TGF-β expression in seria in cervical carcinoma patients,for evaluating the significance of Breg cells in cervical clinical monitoring.Methods:Br1 subsets in peripheral blood were detected by indirect immunofluorescent staining and the expression level of IL-10 and TGF-β were detected by ELISA in 50 cases with cervical carcinoma.Results:The proportion of Br1 increased in comparison with normal control(P<0.05).The expression levels of IL-10 expression in patients"seria were higher than those of control groups (P<0.05);the levels of plasma IL-10 were significantly higher in patients with infiltration as compared with patients with control groups(P<0.05).Conclusion:Predominant expression of IL-10 in cervical cancer patients suggests that Br1 cells may involve in the development of cervical cancer.
      Key Wordscervical carcinoma;development;Breg
      宫颈癌是最常见的妇科肿瘤之一,其确切的病因仍未明确。普遍认为,高危性人乳头瘤病毒(high risk human papillomavirus,hrHPV)的感染是导致宫颈癌的主要原因之一[1]。还有研究表明,宫颈癌的发生同时受其他因素影响,如患者细胞免疫功能低下[2]。
      新近研究提示,除分泌抗体的致病性B细胞外,还存在分泌IL-10或TGF-β等细胞因子的调节性B细胞(regulatory B cells,Bregs),分别称为产生IL-10的Br1细胞或TGF-β1的Br3细胞[3,4]。Bregs通过产生抑制性细胞因子或分泌抑制性抗体影响其他免疫细胞的功能,减缓炎症症状。而慢性炎症又是肿瘤的主要诱发因素[5],Br1细胞及其分泌的IL-10可存在于多种慢性炎症疾病,表明Br1细胞参与慢性炎症的病理机制。
      为了深入探讨Breg细胞亚型与宫颈癌的发生、发展之间的关系,本文针对不同病程的宫颈癌患者外周血Br1细胞亚群及血清中IL-10及TGF-β水平进行检测,以期找到Breg细胞亚型在宫颈癌诊断、治疗及预后中的作用。
      
      资料与方法
      主要试剂:兔抗人CD 5抗体(FITC)和CD 19抗体(PE)为Santa公司产品,IL-10及TGF-β的ELISA检测试剂盒为北京达科为生物技术有限公司产品。淋巴细胞分层液为sigma产品。
      临床资料及标本:2007年12月~2010年12月宫颈癌患者外周血。所有患者术前均未做过放化疗,患者年龄25~70岁,平均47岁。根据1995年FIGO修订的临床分期标准50例标本中Ia期5例,Ib期8例,Ⅱ a期13例,Ⅱb期20例,Ⅲ期4例。组织分化程度:高分化7例,中分化20例,低分化23例。取同期子宫肌瘤切除的正常宫颈25例作为正常对照。
      实验方法:间接免疫荧光法:外周血1ml,肝素抗凝。用淋巴细胞分层液分离单个核细胞,PBS洗2次,计数。取106个单个核细胞,分别加入抗CD 5抗体和抗CD 19抗体20μl,将标本与抗体充分混匀后,30温育1小时。取出后用2ml红细胞裂解液裂解10分钟,离心后弃上清,用PBS洗2遍,上流式细胞仪做荧光检测。
      ELISA:常规收集血清,IL-10含量测定采用ELISA法,按试剂盒说明书操作,在450nm处读取光密度值。
      统计学处理:用EXCEL软件处理数据,各计量资料以平均值±标准差表示,两样本均数的比较采用t检验;两因素相关分析采用直线相关分析,检验水准α0.05,以P<0.05为差异有显著性。
      
      结 果
      宫颈癌患者外周血Br1亚群数量与疾病的关系:见表1,宫颈癌患者外周血中Br1亚群所占的比例增多,与正常对照组比较有统计学意义(P<0.05)。分化程度越低,Br1的所占的比例就越多,中低分化的宫颈癌患者Br1亚群数量明显高于高分化组(图1-左)。并且随着浸润程度的增加,Br1的数量增加的越多(图1-右)。
      Br1细胞通过分泌IL-10抑制肿瘤患者的免疫功能:宫颈癌患者血清IL-10水平与分化程度呈负相关,分化程度越低,血清IL-10的水平越高,差异具有统计学意义(P<0.05)。表2可见,宫颈癌患者血清IL-10水平随着浸润程度的增加而增加,差异具统计学意义(P<0.05)。而TGF-β的变化则没有IL-10明显,中低分化的宫颈癌患者虽然TGF-β有所增加,但是没有统计学差异,也不随分化程度及浸润程度的变化而变化。见表1。
      
      讨 论
      1996年,Janeway等[6]首先报导了具有免疫调节功能的B细胞亚群,此类细胞与多种疾病,如风湿性关节炎(RA)、糖尿病、多发性硬化症及肿瘤相关[7,8]。Bregs主要经由炎症反应诱导产生,以此抑制炎症过度反应引起的组织损伤,加速机体恢复进程。Bregs可通过分泌细胞因子或抗体,也可通过直接或间接的作用,抑制炎症反应的发生。而在肿瘤患者中,Bregs可通过抑制自身反应性T细胞抑制自身免疫,也可以通过抑制细胞毒T淋巴细胞活性减弱抗肿瘤免疫[9]。
      而我们的研究结果提示,在宫颈癌中,调节性B细胞亚群(Br1)的数量要比正常对照组多,说明该亚群反应了宫颈癌患者的免疫状态。而通过ELISA方法检测血清中与免疫抑制有关的免疫分子发现,血清中起主要抑制免疫作用的效应分子是IL-10而不是TGF-β,这从另一个角度证明在宫颈癌中调节性B细胞主要以Br 1亚群存在。
      Inoue等研究表明,B细胞CD 40和肿瘤细胞CD 40L相互作用,可诱导B细胞产生IL-10,从而抑制CD 8+ T细胞的生物学活性,降低CD 8+ T细胞和NK细胞产生IFN-γ水平;B 细胞缺失可增加机体对肿瘤的原发性排斥[9]。此外,B细胞产生的IL-10 可能与体外IFN-γ反应性降低有关。Bregs产生的IL-10可以抑制IL-6和IL-12在树突状细胞(DC)中的产生,从而进一步抑制TH 1和TH 17细胞的发育[8-10]。Bregs能否像Tregs一样代表独立的调节性细胞以及调节机制仍有待进一步阐明。此外,负责Bregs调节细胞功能的信号转导通路和相应的转录因子也需要进一步研究。
      Bregs的发现及功能研究使特异性诱导/祛除Bregs,从而达到治疗各种疾病如肿瘤、感染和自身免疫性病等疾病成为可能,但特异性祛除Bregs更能增强抗肿瘤免疫反应,似乎是更有前景的治疗方法。但是,怎样才能有效地特异祛除Bregs的方法还有待进一步研究。
      
      参考文献
      1 Goncalves MA,Donadi EA.Immune cellular response to HPV:current concepts.Braz J Infect Dis,2004,8(1):1-9.
      2 Bais AG,Beckmann I,Lindemans J,et al.A shift to a peripheral The type cytokine pattern during the carcinogene sis of cervical cancer becomes manifest in CIN Ⅲ lesions.J Clin Pathol,2005,58(10):1096-1100.
      3 Noh J,Choi WS,Noh G,Lee JH.Presence of Foxp3-expressing CD19(+)CD5(+) B Cells in Human Peripheral Blood Mononuclear Cells:Human CD19(+)CD5(+)Foxp3(+) Regulatory B Cell (Breg) Immune Netw.2010,10(6):247-9.
      4 Lee JH,Noh J,Noh G,Choi WS,Cho S,Lee SS.Allergen-Specific Transforming Growth Factor-β-Producing CD19(+)CD5(+) Regulatory B-Cell (Br3) Responses in Human Late Eczematous Allergic Reactions to Cow"s Milk. J Interferon Cytokine Res,2011,Feb 3.[Epub ahead of print]
      5 Karin M,Lawrence T,Nizet V.Innate immunity gone awry:linking microbial infections to chronic inflammation and cancer.Cell,2006,124(4):823-835.
      6 Wdf S D,Janeway C A,Dittel B N,et al.Experimental autoimmune encephalomyelitis induct ion in genet ically B cell deficient mice[J].J Exp Med,1996,184(6):2271-2278.
      7 Inoue S,Scott D,Golding B,et al.Regulatory B cells inhibit antitumor immunity.Cancer Res,2007,67:5059.
      8 Fillatreau S,Gray D,Anderton SM.Not always the bad guys:B cells as regulators of autoimmune pathology.NatRev Immunol,2008,8:391-397.
      9 Inoue S,LeitnerWW,Golding B,et al.Inhibitory effects of B cells on antitumor immunity.Cancer Res,2006,66:7741-7747.
      10 Sun C-M,Deriaud E,Leclerc C,et al.Upon TLR9 tignaling,CD5 + B Cells control the IL2122dependent Th12p riming capacity of neonatalDCs.Immunity,2005,22:467-477.
      表1 IL-10及TGF-β在不同病理分化程度中的阳性表达
      
      表2 IL-10及TGF-β在宫颈癌患者不同浸润深度中的表达
      
      图1 宫颈癌患者中Br1的数量
      

    相关热词搜索:宫颈癌 患者 细胞 调节