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  • 调脂积冲剂对脂肪肝大鼠主动脉脂质的影响 肝区脂质沉积和脂肪肝

    分类:励志歌曲 时间:2019-04-15 本文已影响

      摘要 目的:观察调脂积冲剂对非酒精性脂肪肝模型大鼠肝组织及主动脉脂质的影响。方法:以高脂乳剂建立雄性SD大鼠脂肪肝模型,同时用调脂积冲剂和易善复胶囊分组进行治疗,实验结束后进行肝组织、主动脉匀浆甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)的检测,运用光学显微镜检测HE染色的主动脉壁横切面、肝组织的病理改变。结果:调脂积冲剂能减少非酒精性脂肪肝大鼠主动脉的脂质沉积。结论:调脂积冲剂具有降低肝组织、主动脉脂质沉积的作用,提示不仅对脂肪肝有防治作用,也对防治血管粥样硬化具有一定作用。
      关键词 脂肪肝 调脂积冲剂 主动脉脂质 大鼠 实验研究
      
      随着经济发展,人们饮食及生活方式的改变,脂肪肝、动脉粥样硬化、冠心病的发病率日益增高。据报道[1],4009名上海市机关职员脂肪肝、眼底动脉粥样硬化和冠心病的检出率分别为12.9%、10.9%、1.6%,相关分析表明前者与后两者之间关系密切。脂肪肝不仅与肝脏本身病变及功能有关,而且与心脑血管疾病具有共同的危险因素,并有交互作用,互为因果。调脂积冲剂由莪术、郁金、莱菔子、半夏、生山楂、川朴、枳壳、泽泻、白蔻仁、虎杖、过路黄等药物组成,具有祛瘀化浊、消导行滞、疏理解郁的功效。本研究探讨调脂积冲剂对非酒精性脂肪肝大鼠肝组织及主动脉脂质的影响。
      
      1 材料和方法
      
      1.1 实验动物:健康SD雄性大鼠40只,清洁级,体重200±20g,由浙江中医药大学动物实验中心提供;大鼠饲养于18~22℃、明暗各12h的清洁级动物实验室。
      1.2 主要药品和试剂:调脂积冲剂由浙江省中医院中药房提供;易善复胶囊由北京赛诺菲安万特产品生产;脂肪乳剂组成:胆固醇由上海思吉生物制品有限公司生产;熟猪油由杭州世纪联华连锁超市炼制;吐温-80由浙江温州清明化工有限公司生产;丙二醇由如皋市金陵试剂厂生产;胆盐由杭州微生物试剂有限公司生产;丙硫氧嘧啶片由南通精华制药股份有限公司生产;空腹胰岛素(FINS)测定试剂盒由北京北方生物技术研究所生产。
      1.3 分组和处理方法:SD雄性大鼠40只,确定正常对照组10只,其余30只采用高脂乳剂建立脂肪肝模型[2],乳剂成分:每100ml脂肪乳中含10g胆固醇,25g猪油,2g胆酸,1g丙基硫氧嘧啶,20ml丙二醇,25ml吐温-80。确定大鼠调脂积冲剂的用药量为1.5ml/100g体重,临用前将调脂积颗粒稀释为0.3g/ml溶液;易善复的用药量为lml/100g体重,临用前将易善复胶囊溶于蒸馏水中,超声波乳化,配成0.009g/ml的溶液,4℃冷藏备用。
      每天上午给模型组、调脂积治疗组、易善复治疗组以15ml/kg体重脂肪乳灌胃,空白对照组灌服等量蒸馏水。每天下午按1.5ml/100g体重给调脂积组灌服调脂积溶液,按lml/100g体重给易善复治疗组灌服易善复溶液。模型组和空白对照组按lml/100g体重灌服生理盐水,连续8周。并于第8周末次给药后禁食。
      第8周末,除去中期检验性死亡大鼠每组各2只,各组大鼠于末次给药后禁食12小时,次日上午称大鼠体重后,以10
      �Symbole@@ 水合氯醛1ml/kg体重麻醉,解剖取肝组织以及从肾动脉的开口处到升主动脉段的主动脉。
      肉眼观察其体积、包膜紧张度、颜色、切面色泽等外观情况;沿肝门最大横切面取左叶右叶各一片置于4%甲醛中固定,逐级乙醇脱水,石蜡包埋,切片,HE染色,光镜观察;另取新鲜肝组织0.1g加提取液(为氯仿与甲醇1∶1体积配合)2.0ml,在低温下研成匀浆,再补加提取液3.0ml,混匀;经24h抽提,不断振摇,最后3000r/min离心5min,提取上清液,送检胆固醇(TG)、胆固醇(TC)[3]。取出从肾动脉的开口处到升主动脉段的主动脉,预冷生理盐水冲洗,均匀分成两段。肉眼观察血管内壁光滑度、脂质条纹等。取一段主动脉,用4%多聚甲醛固定,逐级乙醇脱水,石蜡包埋,主动脉纵轴方向切片,HE常规染色;光镜下观察泡沫细胞和胆固醇结晶、各层细胞脂质浸润、管腔内管壁厚薄、是否有粥样和纤维样的斑块等;称量另一段主动脉,加入预冷的生理盐水,用匀浆机在冰水中制成10%的肝匀浆,4℃离心,3500r/min,10min,提取上清液,全自动生化分析仪上测定主动脉TG、TC。
      1.4 肉眼观察:肉眼观察肝组织的体积、包膜紧张度、颜色、切面色泽等外观情况及主动脉血管内壁光滑度、脂质条纹等。
      1.5 光镜标本:沿肝门最大横切面取左叶右叶各一片置于4%甲醛中固定,逐级乙醇脱水,石蜡包埋,切片,HE染色,光镜观察;取一段主动脉,用4%多聚甲醛固定,逐级乙醇脱水,石蜡包埋,主动脉纵轴方向切片,HE常规染色;光镜下观察泡沫细胞和胆固醇结晶、各层细胞脂质浸润、管腔内管壁厚薄、是否有粥样和纤维样的斑块等。
      1.6 匀浆脂质检测:取新鲜肝组织0.1g加提取液(为氯仿与甲醇1∶1体积配合)2.0ml,在低温下研成匀浆,再补加提取液3.0ml,混匀;经24h抽提,不断振摇,最后3000r/min离心5min,提取上清液,送检TC、TG[3]。称量一段主动脉,加入预冷的生理盐水,用匀浆机在冰水中制成10%的肝匀浆,4℃离心,3500r/min,10min,提取上清液,全自动生化分析仪上测定主动脉TG、TG。
      1.7 统计学处理:数据经SPSS17.0软件处理,所得结果均用x±s表示,组间差异采用方差分析。
      
      2 结果
      
      2.1 调脂积冲剂对高脂饲料喂养大鼠的影响:高脂饲料喂养大鼠4周时正常对照组、模型组各取2只大鼠眼眶取血测TC、TG,模型组略高于空白组。6周时,每组各取2只大鼠麻醉解剖,取肝组织、主动脉进行中期检验,高脂乳剂干预各组肝组织较正常对照组明显增大、切面有油腻感,主动脉部分可见白色小突起物。提示造模成功后,于8周时麻醉解剖,模型组大鼠肝重、肝指数均高于正常组大鼠,调脂积冲剂干预组大鼠肝重、肝指数均明显低于脂肪肝模型组(P   正常对照组大鼠见主动脉内膜光滑、完整,无隆起,中膜平滑肌细胞排列整齐,未见平滑肌细胞增生,外膜未见异常;模型组大鼠可见主动脉内膜轻度增厚,局部隆起,中膜平滑肌细胞增生,排列不规整,内皮下层及中膜可见空泡变,外膜未见异常;易善复组内膜隆起,局部增厚,排列不规整,内膜及中膜偶可见空泡变;调脂积组内膜隆起,局部增厚,排列不规整,内膜及中膜偶可见空泡变。
      病理切片经光镜下观察示,造模各组内膜隆起明显(P

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